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在早期進(jìn)行顯微鏡照相時(shí),我們通常就是把一架普通的135照相機(jī)與一臺(tái)顯微鏡的直立鏡筒簡(jiǎn)單連接起來(lái),同時(shí)在照相機(jī)透鏡不被移出的情況下,就以一般照相機(jī)的使用方法進(jìn)行顯微照相。但我們也應(yīng)注意以下幾點(diǎn):*點(diǎn),照相機(jī)應(yīng)放置在目鏡上方適當(dāng)?shù)奈恢?,使得出瞳正好在照相機(jī)透鏡的前表面上,出瞳的位置可以簡(jiǎn)單用一塊熒光玻璃及一張白紙來(lái)檢驗(yàn),同時(shí)它應(yīng)該在出射光束的zui小直徑處。而且除了來(lái)自顯微鏡的光以外,還應(yīng)該用遮套避免其他光線進(jìn)入照相機(jī)。第二點(diǎn),對(duì)顯微鏡像進(jìn)行地聚焦,并將照相機(jī)上的距離調(diào)節(jié)至無(wú)限遠(yuǎn)...
隨著科研水平的提高和實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,人們對(duì)生命科學(xué)領(lǐng)域的探索也在不斷深入。以前,人們依靠觀察固定的組織標(biāo)本,揭示了許多自然的奧秘,但是在科學(xué)技術(shù)高速發(fā)展的今天,科研人員希望在zui真實(shí)的條件下來(lái)觀察活體細(xì)胞,研究細(xì)胞表面和內(nèi)部的動(dòng)態(tài)變化,甚至觀察細(xì)胞內(nèi)單分子的運(yùn)動(dòng)情況。全內(nèi)反射(totalinternalreflection)基本理論-Snells’Law全內(nèi)反射現(xiàn)象是生活中的一種常見(jiàn)現(xiàn)象,如右下圖所示,當(dāng)一束平面光波從折射率為n1的介質(zhì)進(jìn)入到折射率為n2的介質(zhì)中。入射光在兩...
奧林巴斯顯微鏡配套:多維圖像分析軟件Imaris對(duì)于從事生命科學(xué)領(lǐng)域的研究者來(lái)說(shuō),除了要掌握高超的實(shí)驗(yàn)技術(shù)之外,圖像分析技能也是必須掌握的一門(mén)手藝。筆者因?yàn)楣ぷ鞯年P(guān)系,平時(shí)會(huì)接觸到很多科學(xué)研究者,他們經(jīng)常和筆者咨詢(xún)一些圖像分析的問(wèn)題,如:“我要分析熒光共聚焦圖片,要分析樹(shù)突長(zhǎng)度和樹(shù)突棘,要分析細(xì)胞遷移過(guò)程……,你能給我推薦合適的分析軟件嗎?”目前市面上流行很多圖像分析軟件,如Image-ProPlus,ScionImage,Neurolucida,ImageJ等等,每款軟件都...
單分子成像定位超分辨顯微鏡當(dāng)前通過(guò)光活化或光開(kāi)關(guān)及位置測(cè)定的超高分辨熒光成像使我們可以理解細(xì)胞功能如何在分子水平表達(dá)及編碼。在近些年所有超分辨的成像技術(shù)中,定位顯微鏡獨(dú)樹(shù)一幟,因?yàn)樗鼈鬟_(dá)著單分子的分布、距離等信息。在分子水平直接產(chǎn)生實(shí)驗(yàn)反饋觀察復(fù)雜的生理反應(yīng),另外有效的染料標(biāo)識(shí)的出現(xiàn)可獲得真實(shí)的分子水平的分辨率,這使得定位顯微鏡更加強(qiáng)大。定義超分辨技術(shù)傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡在xy方向的分辨極限是250nm,z軸方向是450-700nm。這個(gè)極限也被叫做點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)PSF,是一個(gè)點(diǎn)的光通...
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